NANG DOXYCYCLIN

Capsulae Doxycyclini

Là nang cứng chứa doxycyclin hydroclorid (doxycyclin hyclat)

Chế phẩm phải đáp ứng các yêu cầu trong chuyên luận "Thuốc nang" (Phụ lục 1.13) và các yêu cầu sau đây:

 

Hàm lượng doxycyclin, C₂₂H₂₄N₂O₈, từ 95,0 đến 110,0%  so với hàm lượng ghi trên nhãn.

Tính chất

Nang cứng, bột thuốc trong nang màu vàng hay vàng nhạt.

Định tính

A. Phương pháp sắc ký lớp mỏng (Phụ lục 5.4).

Bản mỏng : silicagel H.

Sau khi tráng bản mỏng, phun đều lên lớp mỏng dung dịch dinatri dihydro ethylendiamin tetraacetat 10% đã chỉnh đến pH 9,0 bằng dung dịch natri hydroxyd 10 M (TT) ( khoảng 10 ml cho một bản 100 x 200 mm ). Để khô ở vị trí nằm ngang trong ít nhất 1 giờ. Trước khi sử dụng hoạt hoá bản mỏng ở 110 °C trong 1 giờ.

Hệ dung môi : Nước - methanol - dicloromethan (6 : 35 : 59).

Dung dịch thử: Lắc một lượng bột viên tương ứng 50 mg doxycyclin với 100 ml methanol (TT) trong 1-2 phút, ly tâm lấy phần dung dịch trong ở trên.

Dung dịch đối chiếu (1): Hoà tan một lượng doxycyclin hydroclorid chuẩn tương ứng với 50 mg doxycyclin trong 100 ml methanol (TT) .

Dung dịch đối chiếu  (2): Hoà tan 50 mg tetracyclin hydroclorid chuẩn và 50 mg doxycyclin hydroclorid trong 100 ml methanol (TT) .

Cách tiến hành: Chấm riêng biệt 1 ml mỗi dung dịch trên lên bản mỏng. Sau khi triển khai dung môi đi được khoảng 15 cm, lấy bản mỏng ra để khô ở nhiệt độ phòng. Quan sát dưới ánh sáng tử ngoại ở bước sóng 365 nm.

Vết chính trên sắc ký đồ của dung dịch thử phải phù hợp với vết chính trên sắc ký đồ của dung dịch đối chiếu (1) về vị trí màu sắc và kích thước. Phép thử chỉ có giá trị khi dung dịch đối (2) cho 2 vết tách biệt rõ rệt .

B. Lấy một lượng bột viên tương ứng với 0,5 mg doxycyclin, thêm 2 ml acid sulfuric (TT), màu vàng tạo thành.

C. Lấy một lượng bột viên tương ứng với 10 mg doxycyclin, lắc kỹ với 10 ml nước, lọc, dịch lọc cho phản ứng của ion clorid (Phụ lục 7.1).

Độ hoà tan (Phụ lục 11.4)

Trong quá trình thử, duy trì khoảng cách giữa cánh khuấy và đáy bình ở khoảng  4,5  ± 0,5 cm

Thiết bị : Kiểu cánh khuấy.

Môi trường hoà tan: 900 ml nước.

Tốc độ quay: 75 vòng/ phút.

Thời gian: 30 phút.

Cách tiến hành: Lấy một phần dung dịch môi trường đã hoà tan mẫu thử sau thời gian qui định, lọc và pha loãng nếu (cần). Đo độ hấp thụ của dung dịch ở bước sóng cực đại 276 nm (Phụ lục 4.1), cốc đo dày 1 cm, mẫu trắng là môi trường hoà tan.Tiến hành so sánh với dung dịch doxycyclin hydroclorid chuẩn có nồng độ tương đương. Tính hàm lượng của doxycyclin, C₂₂H₂₄N₂O₈ , đã hoà tan dựa vào hàm lượng của doxycyclin trong doxycyclin hydroclorid chuẩn.

Yêu cầu: Không ít hơn 80% lượng doxycyclin  so với lượng ghi trên nhãn được hoà tan sau 30 phút.

 

Nước

Không được quá 8,5% (Phụ lục 10.3).

 Định lượng

Dung môi pha loãng: Dung dịch acid hydrocloric 0,01M.

Pha động: Chuyển 2,72 g kali dihydrogen phosphat (TT), 0,74 g natri hydroxyd (TT), 0,5 g tetrabutylamoni hydrogen sulfat (TT) và 0,4 g natri edetat (TT) vào bình định mức 1000 ml.Thêm khoảng 850 ml nước và lắc kỹ để hoà tan. Thêm 60 g alcol tertiary butyl (TT) với sự trợ giúp của nước . Pha loãng với nước vừa đủ đến vạch , và điều chỉnh tới  pH 8,0 ± 0,1 với natri hydroxyd  1 M (TT). Lọc qua màng lọc 0,5 µm. Điều chỉnh tỷ lệ pha động nếu cần. Tăng nồng độ alcol tertiary butyl để có thời gian lưu của doxycyclin dài hơn và cải thiện sự tách biệt của doxycyclin với các tạp chất liên quan khác

Dung dịch chuẩn : Chuyển khoảng 12 mg doxycyclin hydroclorid chuẩn đã cân chính xác vào bình định mức 10 ml, thêm 6 ml dung môi pha loãng, lắc siêu âm cho tới khi hoà tan hoàn toàn ( khoảng 5 phút), pha loãng với dung môi pha loãng tới thể tích và trộn đều .

Dung dịch thử : Cân 20 viên, tính khối lượng trung bình bột thuốc trong nang, trộn đều. Cân chính xác 1 lượng bột viên tương ứng với khoảng 0,1 g doxycyclin hydrochlorid chuyển vào trong bình định mức 100 ml. Thêm khoảng 75 ml dung môi pha loãng, trộn đều và lắc siêu âm trong khoảng 5 phút, sau đó tiếp tục lắc cơ học trong 15 phút. Để nguội, pha loãng với dung môi pha loãng vừa đủ đến vạch và trộn đều. Lọc qua màng lọc 0,5 µm hoặc kích thước nhỏ hơn

Dung dịch phân giải : Chuẩn bị dung dịch  doxycyclin hydroclorid chuẩn trong dung môi pha loãng để được dung dịch có chứa 6 mg doxycyclin trong 1 ml. Chuyển 5 ml dung dịch này vào trong 1 bình định mức 25 ml , đun nóng trên nồi cách thuỷ trong 60 phút và làm bay hơi tới khô trên một đĩa nóng, chú ý tránh để cắn cháy thành than. Hoà tan cắn trong acid hydrocloric 0,01M (TT), pha loãng với dung môi pha loãng tới thể tích và trộn, lọc dung dịch qua màng lọc 0,5 µm hoặc kích thước nhỏ hơn. Sử dụng dung dịch này làm dung dịch phân giải.Dung dịch này có chứa hỗn hợp của 4-epidoxycyclin, 6-epidoxycyclin và doxycyclin. Nếu bảo quản trong tủ lạnh, dung dịch này có thể sử dụng trong vòng 14 ngày

Chú ý : Bảo vệ các dung dịch chuẩn và thử khỏi tác động của ánh sáng

Điều kiện sắc ký :

Cột thép không gỉ (25 cm x 4,6 mm ), nhồi pha tĩnh hạt copolymer styren-divinylbenzen tròn, cứng (5-10 µm).

Nhiệt độ cột : Được duy trì ở nhiệt độ 60 ± 1 ^oC.

Detector UV : 270 nm .

Tốc độ dòng : 1 ml/phút.

Thể tích tiêm: 20 µl.  

Cách tiến hành:

Kiểm tra khả năng thích hợp của hệ thống sắc ký: Tiến hành sắc ký với dung dịch phân giải, ghi các pic đáp ứng, thời gian lưu tương đối của 4-epidoxycyclin (sản phẩm phân huỷ chính ) là 0,4; 6-epidoxycyclin là 0,7 và doxycyclin là 1,0. Hệ số phân giải giữa các pic của 4-epidoxycyclin và doxycyclin là không nhỏ hơn 3,0 và hệ số đối xứng cho pic doxycyclin là không quá 2,0. Tiến hành sắc ký 6 lần với dung dịch chuẩn, độ lệch chuẩn tương đối của diện tích pic doxycyclin  không quá 2,0%.

Tiến hành sắc ký lần lượt với dung dịch chuẩn và dung dịch thử. Ghi lại sắc ký đồ trong khoảng thời gian bằng 1,7 lần thời gian lưu của doxycyclin và xác định diện tích các pic chính .

Tính hàm lưọng doxycyclin, C₂₂H₂₄N₂O₈ , có trong viên dựa vào diện tích pic chính thu được trên sắc ký đồ của  dung dịch chuẩn, dung dịch thử và hàm lượng doxycyclin trong doxycyclin hydrochlorid chuẩn.

Bảo quản

Đựng trong lọ kín hay ép trong vỉ bấm, để nơi mát, tránh ánh sáng trực tiếp.

 

Loại thuốc

Kháng sinh

Hàm lượng thường dùng

100 mg.